1.目的和要求

　　1.1學習索氏提取法測定脂肪的原理和方法。

　　1.2掌握索氏提取的基本操作要點和影響因素。

　　2.原則

　　利用脂肪可溶于有機溶劑的特性，在索氏提取器中用無水乙醇或石油醚反復提取樣品，提取樣品中的脂肪后，蒸發溶劑，得到的物質為脂肪或粗脂肪。

　　3、儀器和試劑

　　3.1索氏提取器如圖3-3所示。

　　3.2電加熱恒溫鼓風干燥箱。

　　3.3烘干機。

　　3.4恒溫水浴箱。

　　3.5濾紙管。

　　3.6無水乙基mi(不包括過氧化物)或石油mi(沸程30℃ ~ 60℃)

　　4、測定步驟

　　4.1樣品處理

　　4.1.1固體樣品:準確稱取2g ~ 5g(精確至0.01mg)均勻樣品，置于濾紙管中。

　　4.1.2液體或半固體:準確稱取5g ~ 10g (J精確至0.01mg)的均勻樣品，置于蒸發皿中，加入20g海砂，攪拌均勻，然后在沸水浴中蒸發，然后在95℃ ~ 105℃下干燥。磨好后全部轉入濾紙筒，用沾有B mi的脫脂棉擦拭所用器皿，棉花也放入濾紙筒。

　　4.2索氏提取器清洗

　　用蒸餾水徹底清洗索氏提取器的所有部件，然后干燥。將脂肪瓶在103℃±2℃的烘箱中干燥至恒重(兩次稱量之差小于2mg)。

　　4.3樣品測定

　　4.3.1將濾紙筒放入索氏提取器的提取筒中，連接已干燥至恒重的脂肪燒瓶，從提取器冷凝管上端加入乙基mi或石油醚至瓶內容積的2/3，通入冷凝水，將底瓶浸入水浴中加熱，用脫脂棉小球輕輕塞入冷凝管上口。

　　4.3.2萃取溫度的控制:應控制水浴的溫度，使萃取液每6-8分鐘回流一次。

　　4.3.3提取時間的控制:提取時間取決于樣品中粗脂肪的含量，一般樣品為6 ~ 12小時，堅果樣品為16小時。萃取結束時，用磨砂玻璃盤取一滴萃取液，如果沒有油斑，則表示萃取完成。

　　4.3.4提取完成。取下脂肪瓶，回收第二瓶或第三瓶石油。當燒瓶中只剩下1 ~ 2ml的B-mi時，應在水浴中除去殘留溶劑，在95℃ ~ 105℃下干燥2h，在干燥器中冷卻至室溫，并稱重。繼續干燥30分鐘，然后冷卻稱重，反復干燥至恒重(兩次稱重之差不超過2 mg)。

　　5.成績統計

　　5.1數據記錄表格

　　樣品質量m/g脂肪瓶質量m0/g脂肪和脂肪瓶質量(m1)(單位:克)

　　亞二次d三次恒重值

　　5.2計算公式

　　X(%)= ×100

　　式中:x—樣品中粗脂肪的質量百分比，單位為%。

　　m——樣品的質量，單位為克(g );

　　M0指脂肪瓶的質量，單位為克(g );

　　M1指脂肪和脂肪瓶的質量，單位為克(g)..

　　6.有關注意事項

　　6.1萃取劑b mi易燃易爆，應注意通風，無火源。

　　6.2樣品濾紙管的高度不能超過虹吸管，否則上層脂肪無法抽出，造成誤差。

　　6.3樣品和乙醚提取物在烘箱中干燥時，時間不宜過長，以防止不飽和脂肪酸受熱氧化，增加其質量。

　　6.4如果第二次mi放置時間過長，將會產生過氧化物。過氧化物不穩定，蒸餾或干燥時會發生這種情況，使用前應嚴格檢查并去除。

　　6.4.1檢驗方法:取5mL mi B于試管中，加入1ml KI(100g/L)溶液，充分搖勻1min。原地不動，分層。如果有過氧化物，會釋放出游離碘，水層呈黃色(或加入4滴5 g/L淀粉指示劑呈藍色)，那么使用前要進行二次mi處理。

　　6.4.2去除過氧化物的方法:將第二次mi倒入蒸餾瓶中，加入一段不生銹的鐵絲或鋁線，收集重新蒸餾的第二次mi。

　　6.5反復加熱可能會因脂質氧化導致體重增加。當體重增加時，應以增重前的體重作為恒重。

　　7.思考問題

　　7.1簡述索氏提取器的提取原理和適用范圍？

　　7.2濕樣可以直接用B mi提取嗎？為什么？

　　7.3使用B mi作為抽脂的溶劑需要注意什么？為什么？