1.目的和要求
1.1學習索氏提取法測定脂肪的原理和方法。
1.2掌握索氏提取的基本操作要點和影響因素。
2.原則
利用脂肪可溶于有機溶劑的特性,在索氏提取器中用無水乙醇或石油醚反復提取樣品,提取樣品中的脂肪后,蒸發溶劑,得到的物質為脂肪或粗脂肪。
3、儀器和試劑
3.1索氏提取器如圖3-3所示。
3.2電加熱恒溫鼓風干燥箱。
3.3烘干機。
3.4恒溫水浴箱。
3.5濾紙管。
3.6無水乙基mi(不包括過氧化物)或石油mi(沸程30℃ ~ 60℃)
4、測定步驟
4.1樣品處理
4.1.1固體樣品:準確稱取2g ~ 5g(精確至0.01mg)均勻樣品,置于濾紙管中。
4.1.2液體或半固體:準確稱取5g ~ 10g (J精確至0.01mg)的均勻樣品,置于蒸發皿中,加入20g海砂,攪拌均勻,然后在沸水浴中蒸發,然后在95℃ ~ 105℃下干燥。磨好后全部轉入濾紙筒,用沾有B mi的脫脂棉擦拭所用器皿,棉花也放入濾紙筒。
4.2索氏提取器清洗
用蒸餾水徹底清洗索氏提取器的所有部件,然后干燥。將脂肪瓶在103℃±2℃的烘箱中干燥至恒重(兩次稱量之差小于2mg)。
4.3樣品測定
4.3.1將濾紙筒放入索氏提取器的提取筒中,連接已干燥至恒重的脂肪燒瓶,從提取器冷凝管上端加入乙基mi或石油醚至瓶內容積的2/3,通入冷凝水,將底瓶浸入水浴中加熱,用脫脂棉小球輕輕塞入冷凝管上口。
4.3.2萃取溫度的控制:應控制水浴的溫度,使萃取液每6-8分鐘回流一次。
4.3.3提取時間的控制:提取時間取決于樣品中粗脂肪的含量,一般樣品為6 ~ 12小時,堅果樣品為16小時。萃取結束時,用磨砂玻璃盤取一滴萃取液,如果沒有油斑,則表示萃取完成。
4.3.4提取完成。取下脂肪瓶,回收第二瓶或第三瓶石油。當燒瓶中只剩下1 ~ 2ml的B-mi時,應在水浴中除去殘留溶劑,在95℃ ~ 105℃下干燥2h,在干燥器中冷卻至室溫,并稱重。繼續干燥30分鐘,然后冷卻稱重,反復干燥至恒重(兩次稱重之差不超過2 mg)。
5.成績統計
5.1數據記錄表格
樣品質量m/g脂肪瓶質量m0/g脂肪和脂肪瓶質量(m1)(單位:克)
亞二次d三次恒重值