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公司新聞
應用固相萃取技術時的注意事項
2023-10-06IP屬地 湖北44

  1.盡量慢一點。

  當我們使用固相萃取器時,我們面臨一個問題:液體應該以什么樣的速度流出柱子?我的經驗是,要想取得好的效果,就要盡量慢。。

  對于固相萃取儀的柱內填料,如果局部看,放大看,其實有很多空間和很多通道供液體流通。如果流動速度很快,待檢測成分中的相當一部分將在與填料充分相互作用之前從通道中流失。所以慢下來,給他們一個充分的機會。

  有多慢?一招是不用所謂的固相萃取儀配合抽氣器,而是用重力法。利用重力使液體向下流動。就實驗速度而言,重力法遠不如吸力法,但就實驗效果而言,重力法遠優于吸力法。抽吸法只能獲得條帶吸附,重力法可以獲得柱頭吸附。在速度和效果的平衡上,我們還是傾向于優先保證好的效果。

  舉個例子,如果在一個3ml500mg的C18柱中加入甲醇進行活化,甲醇全部流到篩板需要20分鐘左右,而通過樣品溶液時,需要25ml液體* 2個多小時才能流出來,如果重力法使用得當,工作率并不比抽吸法差多少。因為可以充分利用自己的空閑時間,吸引法需要有人在旁邊等著,而重力法因為不需要電,可以充分利用午休和晚上的時間通過柱子。當液體體積較大時,只需連接一個疊加接頭和一個延長管,安排好實驗步驟,工作效率同樣較高。另外,重力法不需要抽氣器和固相萃取儀。

  2.越少越好。

  在固相萃取儀的條件選擇上,有些人為了提高萃取效率,盡量多加液體或者選擇填料量大的小柱,我覺得是很不一樣的。尤其是用重力法的時候,因為效率高,很多時候是柱頭吸附,并不是所有的填料都在起作用。填料越多,不僅液體流出速度會越慢,洗脫時擴散也越明顯。

  所以n. com建議,夠用就行,在能保證效率的情況下,填料盡量少,液體不要加太多。

  3.實驗條件不要太詳細。

  固相萃取器原理上是色譜分離,但在操作上只是作為吸附萃取劑使用。由于填料的性質和緊密程度不同,在實際實驗中,由于追求最佳效果,沒有必要設計復雜的洗脫程序。

  在建立條件上,要充分利用現有資料,盡快建立系統,同時要警惕操作過于復雜的步驟,在實驗效果、實驗速度和可操作性之間取得平衡。

  只使用一次

  固相萃取柱只使用一次。因為嚴格意義上來說,很多物質的吸附是不可逆的,第一次吸附無法洗脫,影響下一次吸附。雖然有人做過重復使用的實驗,但是為了節省一些資金而大幅增加結果的不可靠性和不確定性,是非常不劃算的。

 
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