PCR實驗室布局
一般的PCR實驗室通常分為四個獨立的工作區:試劑制備區、樣品制備區、核酸擴增區和產物分析區。
在熒光定量PCR的檢測方法中,定量PCR實驗室通常分為試劑制備區、樣品制備區、核酸擴增和產物分析區三個獨立的工作區,即普通PCR實驗室后兩個區域合并。
為了避免交叉污染,進入每個工作區必須嚴格遵循單一方向,即只能從試劑制備區→樣品制備區→核酸擴增區→產物分析區。
試劑儲存和制備區]
該實驗區的主要操作是儲存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合物的制備。用于標本制備的試劑和材料應直接運送到該區域,不得經過其他區域。試劑原料必須存放在這個區域,并在這個區域配制成所需的儲存試劑。
[標本制備區]
這方面的主要操作是保存臨床標本、提取和儲存核酸(RNA、DNA)以及在將它們加入擴增反應管和測量RNA時合成cDNA。
[反應混合物的制備和擴增以及擴增產物的分析區域]
該區域主要用于DNA或cDNA擴增和擴增片段的測定。此外,制備的DNA模板和合成cDNA(來自樣品制備區)的添加和主反應混合物(來自試劑儲存和制備區)到反應混合物中的制備也可以在該區域中進行。