經典液相色譜的流動相靠重力緩慢流過色譜柱,因此固定相的粒徑不能太小(約100微米~ 150微米)。將分離后的樣品分階段收集,然后進行分析,這使得經典的液相色譜法不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作復雜。直到20世紀60年代才開發出粒徑小于10μm的高效固定相,并采用高壓輸液泵和自動記錄檢測器,克服了經典液相色譜的缺點,發展成為高效液相色譜,又稱高壓液相色譜。
離子交換色譜法
離子交換色譜通常使用離子交換樹脂作為固定相。一般來說,樣品離子與固定相離子發生可逆交換,由于各組分離器的交換能力不同而實現色譜分離。
凝膠色譜
目前,凝膠色譜既適用于水溶液,也適用于有機溶劑。當使用的洗脫液為水溶液時,稱為凝膠過濾層析,在生物學中應用廣泛。當用有機溶劑作為洗脫劑時,稱為凝膠滲透色譜,在高分子領域應用廣泛。
液相色譜中使用的保留值、塔板數、塔板高度、分離度和選擇性等基本概念與氣相色譜中使用的基本概念一致。